PCV-2陕西株ORF2基因的克隆、分析及原核表达

摘要：

[目的]克隆猪圆环病毒2型陕西分离株(PCV-2 SX株)ORF2基因,并进行序列分析及原核表达.[方法]根据GenBank公布的PCV-2 ORF2基因的核苷酸序列,设计并合成1对特异性引物,应用PCR方法扩增PCV-2 SX株ORF2全长基因,将其克隆入pGEM-T载体中,进行测序及序列分析.然后.将ORF2基因亚克隆人原核表达载体pET-32a中,在大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE和Western-blotting鉴定.[结果]扩增到了702 bp的PCV-2 ORF2全长基因.序列分析结果表明,PCV-2 SX株ORF2基因与广西分离株(EF675237,China GX)和巴西分离株(DQ861802,am21)的核苷酸序列同源性均达98.0%,氨基酸序列同源性均达98.3%,与其他毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别在89.9%～97.9%和88.5%～98.0%.SDS-PAGE可检测到分子质量约为48ku的融合蛋白,主要以可溶性蛋白形式存在.Western-blotting分析表明,重组蛋白可被PCV-2阳性血清所识别.[结论]成功克隆了PCV-2 SX株ORF2基因,并进行了原核表达.

关键词：猪圆环病毒2型、陕西分离株、ORF2基因、序列分析、原核表达

所属期刊栏目：38

分类号：S858.282.65~+9.2(动物医学（兽医学）)

资助基金：陕西省科技攻关项目2009K02-01;教育部新世纪优秀人才支持计划NCET-07-0701

在线出版日期：2016-05-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

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