酿酒酵母启动子的克隆及特性表征

摘要：

为酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞中代谢通量的调节提供调控元件,控制细胞内关键基因在转录水平的高效与精确表达,克隆和表征了酿酒酵母部分启动子元件.主要对酿酒酵母DNA聚合酶和转录因子相关基因的启动子进行挖掘筛选,以绿色荧光蛋白基因(enhanced green fluorescent protein,EGFP)为报告基因,利用 OE-PCR 和酶切连接方式构建了 pRS41 H-Promot-er-EGFP 表达载体.通过测定EGFP 的荧光值表征酿酒酵母启动子的相对强弱及其特征.表征结果显示,共筛选并克隆到 6 个新的酿酒酵母启动子,分别为PCBFⅠ、PPAFⅠ、PPOLⅠ、PPOLⅡ、PPOLⅢ 和PRTFⅠ,它们的相对强度为PPOLⅠ＞PPAFⅠ＞PPOLⅢ＞PPOLⅡ＞PRTFⅠ＞PCBFⅠ.最后探究了启动子PPOLI在酿酒酵母细胞中的表达情况,发现随着酿酒酵母细胞的增长,PPOLⅠ 可以在酿酒酵母细胞中持续发挥作用.该研究为启动子在底盘细胞中调控代谢流平衡的应用提供参考.

关键词：酿酒酵母、启动子、绿色荧光蛋白基因(EGFP)、荧光强度检测、流式细胞仪

所属期刊栏目：37

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金;陕西省自然科学基础研究项目;西安工程大学研究生创新基金项目

在线出版日期：2023-07-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：51-58