长链非编码RNA MRAK088388通过miR-30a/ATG5轴参与儿童过敏性哮喘

摘要：

目的 探究长链非编码核糖核酸(long non-coding ribonucleic acids,lncRNA)MRAK088388 与儿童过敏性哮喘之间的关系.方法 对 15 名健康儿童和 15 名哮喘儿童进行了为期 2 年的疾病进展监测.在疾病慢性期收集患者血液样本,用于 lncRNA/mRNA 表达微阵列分析.通过生物信息学分析鉴定了竞争性内源性 RNA 网络(MRAK088388/miR-30a/ATG5).体外培养支气管上皮(human bronchial epithelial cells,16 HBE)细胞,通过实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)和蛋白质印迹分别用于量化基因和相关蛋白质表达水平.细胞计数试剂盒-8 和 transwell 检测用于评估 16HBE 细胞的增殖和迁移,验证MRAK088388、miR-30a和 ATG5 对哮喘的影响.结果 通过相关分析鉴定出 6 个 lncRNA-miRNA-mRNA.通过qRT-PCR分析,本次研究选择了 MRAK088388/miR-30a/ATG5 来构建 ceRNA 网络.MRAK088388 和 ATG5 表达在哮喘患儿外周血中高表达,miR-30a低表达(P＜0.05).si-MRAK088388+TGF-β1 组后 16HBE细胞中 E-cadherin的表达水平显著升高(P＜0.05),而 Vimentin和α-SMA的表达水平显著降低(P＜0.05),表明敲除 MRAK088388 可抑制 16HBE细胞的上皮间质转化;与 si-NC+TGF-β1 组的形态相比,si-MRAK088388+TGF-β1 组的细胞形态与对照组相似,表明 MRAK088388 敲低减轻了TGF-β1 诱导的细胞形态变化;此外,MRAK088388 敲低还抑制了 TGF-β1诱导的 16HBE细胞增殖和迁移.通过 qPCR 和蛋白质印迹证实了 MRAK088388 通过靶向 miR-30a/ATG5 轴促进儿童哮喘的进展.结论 儿童哮喘与 MRAK088388/miR-30a/ATG5 轴相关,MRAK088388 通过负调控 miR-30a 的表达并调控 ATG5 表达水平升高来影响支气管上皮细胞间质转化、增殖以及迁移,以此来参与儿童过敏性哮喘进程.

关键词：儿童、哮喘、长链非编码RNA、MRAK088388、上皮间质转化

所属期刊栏目：44

分类号：R729;R725.6(儿科学)

在线出版日期：2023-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：764-772