牛膝多糖通过Notch1通路影响骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化的机制

摘要：

目的 探讨牛膝多糖(achyranthes bidentata polysaccharides,ABPS)对骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)向髓核样细胞分化的影响及机制.方法 取5只4周龄SD大鼠,处死后解剖分离BMSCs,反复贴壁纯化,取第3代BMSCs,不同浓度ABPS作用48 h,MTT法检测细胞存活率,选择对BMSCs生长无毒性的ABPS最高浓度进行后续实验.根据处理方式不同将细胞分为对照组(常规培养)、ABPS组(200 mg/L ABPS)、Notch1组(转染Notch1)、Notch1阴性对照组(转染Notch1阴性对照)和ABPS+Notch1组(转染Notch1后加入200 mg/L ABPS).诱导培养14 d后MTT法检测细胞增殖能力,qPCR和Western blotting分别检测collagenⅡ、聚集蛋白聚糖(aggrecan)、Notch1、Hes1 mRNA和蛋白表达水平,取第1、4、7、10、14天细胞培养基阿尔新蓝法检测葡糖胺聚糖(GAG).结果 400 mg/L ABPS作用BMSCs 48 h,细胞存活率与对照组比较显著降低(P<0.05),浓度≤200 mg/L时,ABPS对BMSCs生长无明显毒性作用,选择200 mg/L ABPS进行后续实验.诱导培养14 d后,与对照组比较,ABPS组细胞A值、培养基内GAG含量、collagenⅡ、aggrecan mRNA和蛋白相对表达量升高,Notch1、Hes1 mRNA和蛋白相对表达量降低;而Notch1组细胞A值、培养基内GAG含量、collagenⅡ、aggrecan mRNA和蛋白相对表达量降低,Notch1、Hes1 mRNA和蛋白相对表达量升高(P<0.05);ABPS+Notch1组可部分逆转过表达Notch1对BMSCs向髓核样细胞分化的抑制作用.结论 ABPS可以促进BMSCs向髓核样细胞分化,作用机制可能与抑制Notch1通路有关.

关键词：骨髓间充质干细胞、髓核样细胞、细胞分化、牛膝多糖、Notch1通路

所属期刊栏目：43

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：河南省中医药科学研究专项基金项目No.2019ZY2041

在线出版日期：2022-07-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：600-606