N-乙酰-L-半胱氨酸通过AMPK/mTOR途径激活保护性自噬降低青蒿琥酯诱导的胰腺癌细胞死亡

摘要：

目的 使用活性氧(ROS)清除剂N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)探究青蒿琥酯(ART)对胰腺癌(PC)的抑制作用及机制.方法 ART干预3种PC细胞系CFPAC-1、Capan-2及BxPC3,通过CCK8法检测细胞活性;Transwell法检测细胞迁移能力;Western blotting检测迁移相关蛋白E钙黏蛋白(E-cadherin)、N钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)的表达;ROS探针DCFH-DA检测胞内ROS;用LC3细胞免疫荧光检测胞内自噬小体的形成;加入NAC或自噬抑制剂3-MA后,再通过CCK8法检测细胞活性,Western blotting检测p-AMPK/AMPK、p-mTOR/mTOR、p62及LC3Ⅱ/Ⅰ的表达.结果 ART以时间、剂量依赖的方式抑制CFPAC-1、Capan-2的生长.200μmol/L ART处理CFPAC-1、Capan-2细胞48 h后,E-cadherin表达显著上调,N-cadherin及Vimentin显著下调,细胞迁移能力降低;ART上调胞内ROS水平,促进细胞自噬小体形成;NAC可逆转ART对CFPAC-1、Capan-2细胞的抑制效应,并上调p-AMPK/AMPK、p62、LC3Ⅱ/Ⅰ,下调p-mTOR/mTOR的表达,增强细胞自噬水平.3-MA不能逆转ART对PC细胞的抑制效应.结论 ART依赖ROS,而非自噬发挥抗胰腺癌效应.NAC通过AMPK/mTOR信号通路激活保护性自噬,削弱ART对PC细胞的抑制.

关键词：青蒿琥酯、胰腺癌、活性氧、自噬、AMPK/mTOR

所属期刊栏目：43

分类号：R735.9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金;襄阳市科学技术局项目;襄阳市第一人民医院科技创新项目

在线出版日期：2022-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：354-360