外源性H2S对氧糖剥夺再灌注后SH-SY5Y细胞损伤的保护作用
目的 探讨外源性硫化氢(H2S)对氧糖剥夺再灌注(OGD/R)后SH-SY5Y细胞损伤的保护作用.方法 建立SH-SY5Y细胞OGD/R模型,SH-SY5Y细胞分为对照组、OGD/R模型组、OGD/R+不同浓度NaHS(H2S供体)处理组;OGD/R制备:用不含血清的低糖DMEM培养基在37℃、930 mL/L N2、20 mL/L O2的低氧条件下培养各组细胞12 h,然后用完全培养液复氧培养24 h.采用CCK-8检测存活率,流式细胞技术检测细胞凋亡水平,蛋白印迹方法(Western blotting)检测细胞中内质网应激相关蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)及NF-κBP65、COX-2蛋白表达水平.结果 OGD/R模型组SH-SY5Y细胞活性较对照组降低(P<0.05).0～0.5 mmol/L浓度的NaHS处理组细胞活性随着给予NaHS浓度的增加较OGD/R模型组逐渐升高(P<0.05),超过这个浓度范围,细胞活性较OGD/R模型组降低(P<0.05).模型组细胞的早期凋亡水平均显著高于对照组(P<0.05).0.2、0.4 mmol/L NaHS处理组细胞的早期凋亡水平较OGD/R模型组显著降低、4 mmol/L NaHS处理组细胞的早期凋亡水平较OGD/R模型组显著升高(P<0.05);Western blotting检测结果显示,OGD/R模型组细胞的GRP78、CHOP、NF-κBp65及COX-2蛋白表达水平均显著高于对照组(P<0.05);与OGD/R模型组比较,0.2、0.4、4 mmol/L浓度NaHS处理组细胞的GRP78、CHOP、NF-κBp65及COX-2表达水平显著降低(P<0.05),但各剂量组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 NaHS可以提高经OGD/R损伤后细胞的活性,可能是通过抑制内质网应激诱导的NF-κBp65、COX-2蛋白的激活从而减少细胞凋亡水平来实现.
血管性痴呆;硫化氢;核转录因子-κB;凋亡
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R749(神经病学与精神病学)
国家自然科学基金资助项目;贵州省科技厅基金重点项目[黔科合基础20191440号;贵州省科技厅基金项目[黔科合基础20171149
2021-09-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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