小鼠免疫细胞流式染色过程中细胞丢失量的影响因素
目的 观察和探讨小鼠免疫细胞多色流式染色过程中细胞丢失的影响因素.方法 取C57BL/6J鼠制备脾细胞悬液,分别用不同种类、不同成分和不同pH值缓冲液洗涤和重悬细胞2次,并计数活细胞数量,观察对染色过程中的细胞丢失量有明显影响的因素.结果 在小鼠免疫细胞的流式染色标记过程中,缓冲液种类对细胞丢失量有显著影响,含有钾离子的PBS缓冲液洗涤后会造成明显的细胞丢失;离心机转速过高或过低均会导致显著的细胞丢失;而缓冲液p H值的微量偏移和是否加入FBS/BSA对细胞的丢失影响不明显.结论 小鼠免疫细胞的流式染色过程中使用含有钾离子的PBS缓冲液会造成明显的细胞丢失,应推荐使用不含钾离子的PBS缓冲液,同时保持离心转速适中.
小鼠免疫细胞、多色流式标记、细胞丢失、缓冲液成分
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R450(治疗学)
国家自然科学基金青年基金资助项目81500389,81700447
2019-01-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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