miR-497靶向调控疾病易感基因EFNB2的分子机制研究

摘要：

目的 用分子克隆和双荧光素酶报告基因的方法研究miR-497对精神分裂症易感基因EFNB2的靶向调控作用,为miR-497在精神分裂症中的分子功能研究奠定基础.方法 运用生物信息学在线软件预测,发现与精神分裂症相关的miR-497可能直接调控疾病易感基因EFNB2.随后采用分子生物学技术扩增EFNB2基因3'-UTR中包含与miR-497种子序列相结合的片段,将该片段连接入pmirGLO质粒载体构建野生型的重组体(WT),并突变EFNB2基因3'-UTR与种子序列相结合的碱基序列,构建突变型的重组体(MUT).最后将miR-497阴性对照(NC)和模拟物(mimics)分组转染HEK293T细胞系,并在24、48 h后分别进行双荧光素酶报告基因活性测定.结果 测序结果表明EFNB2基因3'-UTR的野生型(WT)和突变型(MUT)分别成功构建入pmirGLO载体中,表明WT和MUT的重组体均构建成功.转染24、48 h后的双荧光素酶报告基因活性检测结果表明,miR-497 mimics与NC相比,显著性降低了报告基因的活性.结论 本研究在细胞水平证明了miR-497可直接调控精神分裂症易感基因EFNB2,为后续miR-497在精神分裂症中的功能研究提供了新思路和新线索.

关键词：精神分裂症、miR-497、EFNB2、靶基因、分子机制

所属期刊栏目：40

分类号：R749.3(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31371298;国家级大学生创新性实验项目GJ201710698121

在线出版日期：2019-01-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：17-22