动态压应力对大鼠干骺端软骨干细胞PTHrP mRNA表达的影响

摘要：

目的 研究动态压应力对大鼠干骺端软骨干细胞甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)mRNA 表达的影响,进一步探索纤维形肌动蛋白(F-actin)是否参与该力学信号转导过程.方法 免疫磁珠法分离培养大鼠干骺端软骨干细胞.第 3 代大鼠干骺端软骨干细胞按照动态压应力强度的大小随机分为4 组:0%、3%、6%、12%形变组,使用自行制备的动态压应力培养装置对各组细胞施加不同强度的压应力刺激24 h,流式细胞术检测各组细胞周期分布及凋亡率,实时定量PCR检测各组细胞PTHrP mRNA表达水平.进一步,第 3 代大鼠干骺端软骨干细胞按照是否施加压应力及细胞骨架松弛素D随机分为4 组:对照组、单纯压应力组(6 %形变)、压应力+细胞骨架松弛素D组、单纯细胞骨架松弛素D组,各组细胞施加干预 24 h后以鬼笔环肽染 F-actin纤维,置于激光共聚焦显微镜下观察,以及实时定量 PCR检测各组细胞PTHrP mRNA表达水平.结果 流式细胞术结果显示:0%、3%、6%、12%形变组细胞 G0/G1、G2/M及S期比例差异无统计学意义(P＞0.05);3%、6%形变组凋亡率与0%形变组相比,差异无统计学意义(P＞0.05),12%形变组凋亡率明显高于对照组(P＜0.05).激光共聚焦显微镜观察结果表明:单纯压应力组 F-actin纤维排列较对照组整齐,相互平行,与受力方向趋于一致;压应力+细胞骨架松弛素 D组及单纯细胞骨架松弛素 D组细胞内 F-actin纤维结构破坏,相互聚集缠绕成团块状.实时定量PCR结果显示:3%形变组细胞 PTHrP mRNA 表达水平与 0%形变组差异无统计学意义(P＞0.05),6%及 12%形变组细胞PTHrP mRNA表达量明显高于 0%形变组(P＜0.05);单纯压应力组细胞PTHrP mRNA表达量明显高于对照组(P＜0.05),单纯细胞骨架松弛素D组细胞PTHrP mRNA表达量与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),压应力+细胞骨架松弛素D组细胞PTHrP mRNA表达量高于对照组,但低于单纯压应力组(P＜0.05).结论 适当强度的动态压应力可以上调大鼠干骺端软骨干细胞 PTHrP mRNA表达,在该力学信号转导过程中有 F-actin的参与.

关键词：动态压应力、干骺端、软骨干细胞、甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)、肌动蛋白纤维(F-actin)

所属期刊栏目：39

分类号：R68(骨科学（运动系疾病、矫形外科学）)

资助基金：新疆兵团卫生科技计划项目No.wsj201406.Supported by Xinjiang Corps Health Science and Technology Project wsj201406

在线出版日期：2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：509-513