RUNX3基因对RAW264.7巨噬细胞极化的调控作用

摘要：

目的 探讨RUNX3对巨噬细胞极化过程的调节作用和可能机制,为巨噬细胞参与的免疫炎症性疾病提供新的治疗思路.方法 ①分别用IFN-γ、LPS和IL-4刺激RAW264.7细胞,使用RT-PCR方法检测刺激后细胞表面标志物arginase-1、iNOS的表达变化,观察刺激后RAW264.7细胞是否向M1或者M2方向极化;设定IFN-γ和LPS共刺激的细胞为M1组,IL-4刺激的细胞为M2组;另设正常对照组为M0组;②使用免疫荧光、RT-PCR方法检测各组细胞(M1、M2、M0)RUNX3表达情况;③建立RUNX3沉默的载体,沉默RAW264.7细胞系RUNX3基因,经G418选择性培养基筛选得到稳定表达的细胞系,RT-PCR检测细胞表面标志物iNOS和CD86变化,用ELISA法检测细胞分泌物TNF-α变化.结果 ①用IFN-γ和LPS刺激RAW264.7细胞可使RAW264.7细胞向M1亚型极化,RT-PCR检测M1组细胞iNOS表达较M0组升高(P=0.002);而使用IL-4刺激RAW264.7细胞可使RAW264.7细胞向M2亚型极化;RT-PCR检测结果显示,M2组细胞arginase-1表达较M0组升高(P=0.021);②RUNX3 mRNA在M1组细胞与M0组相比,表达增高(P=0.001),而在 M2组细胞中表达降低(P= 0.041);③沉默 RUNX3后,CD86、iNOS mRNA表达较M0组降低(P=0.005),并且细胞分泌TNF-α减少(P＜0.001).结论 RUNX3转录活化可能促进巨噬细胞向M1型极化.

关键词：巨噬细胞、RAW264.7、RUNX3、巨噬细胞极化、基因沉默

所属期刊栏目：39

分类号：R392

资助基金：陕西省自然科学基础研究计划资助No.2014JM4149Supported by the Natural Science Basic Research Plan of Shaanxi Province2014JM4149

在线出版日期：2018-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：216-220