U6和let-7a作为定量检测miRNAs的内参在大鼠软骨中稳定性的比较

摘要：

目的 比较U6和let-7a两种内参在RT-qPCR方法检测大鼠股骨头软骨样本microRNAs(miRNAs)的稳定性.方法 取软骨生成过程的新生(D0)、断乳(D21)、性成熟(D42)3个时间节点的雌性近交系DA大鼠股骨头软骨,提取总RNA,用RT-qPCR方法分别在U6和let-7a两种内参体系下,检测miR-1、-25、-26a、-140、-146a、-150、-181a、-195、-223、-337等的表达,并与课题组前期获得的二代测序绝对定量结果进行比较,综合评价两种内参的稳定性.结果 在D42样本中U6(P=0.045)、let-7a(P=0.0215)的相对值出现了显著性差异;在两种内参体系中miR-26a、-140、-223、-337的表达趋势相同,miR-1、-146a差异无统计学意义,miR-25、-150、-181a、-195都出现了显著性差异(P＜0.05).综合二代测序绝对定量结果比较,let-7a稳定性优于U6.结论 let-7a稳定性优于U6,更适合做软骨miRNA定量的内参.

关键词：软骨、内参、RT-qPCR、U6、Let-7a、microRNAs(miRNAs)

所属期刊栏目：38

分类号：R393

资助基金：国家自然科学基金资助项目81371986,81301598;中国博士后科学基金2014T70928,2013M530427;中央高校基本研究基金No.xjj2015073 Supported by the National Natural Science Foundation of China81371986 and 81301598;China Postdoctoral Science Foundation2014T70928 and 2013M530427;the Fundamental Research Funds for the Central Universitiesxjj2015073

在线出版日期：2017-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：497-501,535