TTF-1启动子调控miR-7表达对人肺癌95D细胞体外凋亡的影响

摘要：

目的 观察甲状腺转录因子-1(TTF-1)启动子调控miR-7表达对人肺癌细胞体外凋亡的影响,并探讨其意义.方法 将前期构建的TTF-1启动子调控miR-7真核表达载体(命名为p-T-miR-7)与对照载体p-cont分别体外瞬时转染人肺癌95D细胞,采用FCM法检测95D细胞凋亡比例;TUNEL法检测95D细胞凋亡情况;Western blot检测各组中磷酸化Caspase3和磷酸化Caspase9的蛋白的表达;共聚焦显微技术检测miR-7靶分子CGGBP1和EGFR蛋白的表达;最后,采用Western blot检测各组中磷酸化Akt和Erk蛋白的表达.结果 体外转染48 h后,与p-cont转染组相比,转染p-T-miR-7组细胞凋亡比例明显增加(P<0.05);磷酸化Caspase3和磷酸化Caspase9蛋白水平均显著增加(P<0.05),同时EGFR和CGGBP1蛋白表达均明显降低,且细胞中磷酸化Akt和Erk蛋白水平亦显著降低(P<0.05).结论 TTF-1启动子调控miR-7表达可导致人肺癌细胞的凋亡.这为后续基于miR-7的人肺癌基因靶向治疗策略的开发提供了前期实验依据.

关键词：miR-7、甲状腺转录因子-1(TTF-1)、启动子、基因治疗、肺癌

所属期刊栏目：38

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31370918;贵州省高层次人才项目黔科合人才20164031 号;贵州省教育厅特色重点实验室建设项目黔教合KY字[2014]212 Supported by the National Natural Science Foundation of China31370918;Guizhou Provincial High-level Talents Program [No.2016 4031],and Characteristic Key Laboratory Construction Program of Guizhou Provincial Department of Education2014212

在线出版日期：2017-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：176-181