ADSCs 与 HUVECs 体外共培养促进HUVECs 增殖及成血管化作用
目的：为制备血管化胰岛，分离、培养脂肪来源干细胞（adipose derived stem cells ，ADSCs ），观察细胞共培养条件下，ADSCs对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell ，HUVECs）增殖及成血管化功能的促进作用并探讨其机制。方法采用胶原酶消化法分别原代培养获得ADSCs与HUVECs ，细胞形态学、免疫荧光或多向诱导分化鉴定，建立 HUVECs与ADSCs接触式及间接共培养体系，设立 HUVECs单独培养为对照组，比较两组成血管化功能、HUVECs增殖状况及上清液血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor ，VEGF）、碱性成纤维生长因子（basic fibroblast growth factor ，b‐FGF）浓度。结果通过原代培养成功获得ADSCs与 HUVECs ；第3代AD‐SCs呈均一的长梭形纤维细胞样形态，免疫荧光检测见CD44／CD49d（＋）、CD31／CD34（－），并具有多向分化功能；第2代 HUVECs免疫荧光检测示vWF／CD31（＋）。于Matrigel内接触式共培养4 h ，ADSCs＋ HUVECs组血管密度高于 HUVECs组；间接共培养时，HUVECs生长曲线于 ADSCs＋ HUVECs 组上移，在对数生长期的第3、4、5天， ADSCs＋ HUVECs组HUVECs计数为（4．52±0．31）×104、（7．18±0．45）×104、（8．23±0．36）×104，大于单独 HU‐VECs组的（2．71±0．25）×104、（4．87±0．26）×104、（6．86±0．33）×104（P＜0．01）；ADSCs＋ HUVECs组 HUVECs群体倍增时间为（1．36±0．23）d ，短于单独 HUVECs组的（1．62±0．31）d。四甲基噻唑蓝（methylthiazol tetraztlium ， MTT）法测定HUVECs的A值培养第1、3、5、7天的ADSCs＋ HUVECs组高于单独 HUVECs组（P＜0．01）。培养第3、7、13天时ADSCs＋ HUVECs组上清液 VEGF、b‐FGF浓度均高于 HUVECs组（P＜0．01）。结论 ADSCs与HUVECs共培养时，ADSCs可能通过分泌或增加 HUVECs分泌VEGF、b‐FGF等细胞因子，进而促进 HUVECs增殖及成血管化。
共培养、脂肪来源干细胞、人脐静脉内皮细胞、细胞增殖、成血管化
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R318.1(医用一般科学)
高等学校博士学科点专项科研基金．20110201110048;国家自然科学基金．81400677;中央高校基本科研业务费专项资金资助No ．08143014 Supported by the Specialized Research Fund for the Doctoral Program of Higher Education．20110201110048;the National Natural Science Foundation of China．81400677;the Central University Special Funding for Basic Scientific Research Expenses．08143014
2016-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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