相关蛋白在携带载脂蛋白-J基因大鼠BMSCs中的表达及意义

摘要：

目的 检测重组质粒pEGFP-N1-apoJ在不同量、不同时间条件下转染大鼠骨髓间充质干细胞的瞬时转染效率,并测定载脂蛋白-J(ApoJ)在靶细胞中能否高表达.方法 贴壁培养细胞,并用脂质体LipofectaminTM 2000分别介导0.8、1.2、1.6、2.0μg重组质粒pEGFP-N1-apoJ转染,置荧光显微镜下观察转染结果,测定在24、48、72h时间点的瞬时转染效率.蛋白免疫印迹法分别检测pEGFP-N1-apoJ质粒转染组、空pEGFP-N1质粒转染组、空白对照组ApoJ的表达情况.结果 不同的质粒量中1.6 μg pEGFP-N1-apoJ质粒与3.0μL脂质体制备的复合物瞬时转染效率最高,分别作用24、48、72 h可达27.8％、34.3％、28.2％.蛋白免疫印迹法检测到pEGFP-N1-apoJ质粒组大量ApoJ表达,空质粒及空白对照组见微量ApoJ表达;并且pEGFP-N1-apoJ质粒组Apo-J的表达明显高于空载体及空白对照组(P＜0.05).结论 利用脂质体介导可将重组质粒pEGFP-N1-apoJ成功转染入大鼠骨髓间充质干细胞,ApoJ在大鼠骨髓间充质干细胞中得到大量表达.

关键词：载脂蛋白-J、重组质粒、骨髓间充质干细胞、瞬时转染、蛋白免疫印迹法

所属期刊栏目：37

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：四川省教育厅重点项目课题12ZA075;泸州市科技局课题2011-I-S45;Key Projects of Sichuan Provincial Education Department12ZA075;Luzhou Science and Technology Bureau2011-I-S45

在线出版日期：2016-04-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：63-67