大鼠脑皮质星形胶质细胞的体外优化培养及鉴定

摘要：

目的：旨在获得高纯度的星形胶质细胞,并对不同培养时期的细胞进行鉴定,为进一步研究奠定基础。方法常规分离新生 SD 大鼠大脑皮质并制备单细胞悬液,采用差速黏附加摇床震荡法对所获得的细胞进行纯化。倒置相差显微镜及 HE 染色观察细胞形态,GFAP 免疫荧光对获得细胞进行鉴定。结果原代培养的皮质细胞从3 d 开始迅速增殖,9~12 d 即可铺满瓶底,此时细胞呈明显的分层生长,星形胶质细胞位于底层,形态多样,阳性率为(67.2±7.1)%；经过1次传代后,GFAP 阳性率有所提升(84.0±6.0)%,但不能完全去除小胶质细胞及少突胶质细胞,细胞仍呈分层生长；至第3次传代后,获得大量几乎为单一种类的星形胶质细胞,其胞体较大、突起较短粗,一般2~3个,胞核圆形或椭圆形,常偏于一侧,GFAP 染色呈强阳性,阳性率可达(97.6±2.4)%。结论通过差速黏附与摇床震荡相结合的方法,获得了高纯度且生长状态良好的星形胶质细胞。

关键词：星形胶质细胞、大脑皮质、细胞培养、大鼠

分类号：Q25(细胞生理学)

资助基金：陕西省自然科学基金资助项目2012JQ4011,2014JM4096;中央高校基本科研业务费专项资金资助项目No.xjj2012011 Supported by the Natural Science Foundation of Shaanxi Province2012JQ4011,2014JM4096;Fundamental Research Funds for the Central Universitiesxjj2012011

在线出版日期：2015-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：849-853