sh-Set7/9表达载体的构建及其在 HepG2细胞中的功能

摘要：

目的：构建 sh-Set7/9表达载体并筛选稳定转染 HepG2细胞株,考察其干扰效果,为后续研究 Set7/9基因的功能及其在肝癌细胞系中的作用提供实验基础。方法寻找靶向序列,设计 siRNA 片段,构建针对人 Set7/9基因的shRNA 和对照载体,将干扰载体和载体稳定转染肝癌细胞 HepG2,Real-time PCR 检测细胞中 Set7/9基因的表达水平；同时利用 Western blot 方法在蛋白质水平进行检测,确定该基因的干扰效果。结果成功构建载体 Set7/9-shR-NA；Real-time PCR 结果显示该基因表达水平明显被抑制(P <0.05),同样 Western blot 检测表明其蛋白表达也显著下调。此外,与其相关的 Sirt1蛋白表达水平提高8.4倍,Suv39h1蛋白表达水平升高1.1倍。结论构建稳定转染株后,可以显著下调 Set7/9基因的表达,同时影响与其相关的 Sirt1和 Suv39h1蛋白表达水平,提示对肝癌 HepG2细胞活性产生影响。

关键词：Set7/9、HepG2 细胞、Western blot、甲基转移酶、载体构建、肝癌

分类号：R735.7(肿瘤学)

资助基金：2013年兰州大学中央高校基本科研业务费No.lzujbky-2013-144 Supported by the Fundamental Research Funds for the Central Universities lzujbky-2013-144

在线出版日期：2015-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：753-757