HtrA1表达被沉默的滋养细胞株HPT-8/pSilencer4.1-HtrA1的构建

摘要：

目的：构建 pSilencer4.1/HtrA1质粒,稳定转染人滋养细胞株 HPT-8。方法免疫组化 SABC 方法检测HtrA1在 HPT-8细胞中的表达；构建 pSilencer4.1/HtrA1质粒；将 pSilencer4.1/HtrA1质粒、pSilencer4.1空白质粒转染 HPT-8,观察转染后细胞 HtrA1的表达情况。结果HPT-8约90%左右的细胞胞质被染成棕黄色,胞核未见明显染色。转染 pSilencer4.1/HtrA1质粒的 HPT-8细胞的 G418筛选质量浓度为200μg/mL。RT-PCR、Western blot法鉴定转染细胞 HtrA1的表达,结果显示转染 Psilence4.1/HtrA1重组质粒的细胞中 HtrA1表达水平较空白质粒、正常细胞明显下降(P 均<0.05)。空白质粒组、HPT-8组间吸光度值无统计学差异(P >0.05)。结论成功构建了稳定的、HtrA1沉默表达的滋养细胞株 HPT-8/pSilencer4.1-HtrA1,为下一步的研究奠定了实验基础。

关键词：滋养细胞、HPT-8、HtrA1、质粒

分类号：R714(妇产科学)

资助基金：陕西省自然科学基础研究项目2014JQ2-8047;中央高校基本科研业务费专项资金资助No.XJJ2014072 Supported by the Natural Science Basic Research of Shaanxi Province2014JQ2-8047;the Fundamental Research Funds for the Central UniversitiesXJJ2014072

在线出版日期：2015-11-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：749-752,757