促红细胞生成素对缺氧复氧心肌细胞 caspase-3表达及Omi/HtrA2转位变化和 Omi/HtrA2沉默时对其的影响

摘要：

目的：观察促红细胞生成素(EPO)及/或进一步沉默 Omi/HtrA2表达时对缺氧复氧(H/R)心肌细胞的影响,探索相关抗细胞凋亡机制。方法培养乳鼠心肌细胞株(H9C2细胞),分组(对照组、H/R 组及各浓度的 EPO 干预组)处理后,酶标仪检测各组细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)释放率,Western blot 检测细胞内 cleaved caspase-3、Omi/HtrA2蛋白表达变化；并观察 Omi/HtrA2在胞质和线粒体的表达变化(转位情况)。再经脂质体法将 Omi/HtrA2特异性 siRNA 干扰片段转染至 H9C2细胞中,RT-PCR 和 Western blot 验证 siRNA 对 Omi/HtrA2表达的沉默效应后,分组同前干预,分别检测各组细胞 LDH 释放率及 cleaved caspase-3表达变化。结果与 H/R 组相比, EPO 干预组细胞上清液 LDH 释放减少,cleaved caspase-3表达减弱；H/R 组 Omi/HtrA2蛋白表达在胞质中表达较对照组增多(向胞质发生转位),而 EPO(20 IU/mL)组其胞质转位减少。经 siRNA 干扰后,与 H/R 组相比,LDH 释放降低,cleaved caspase-3表达减弱,差异均有统计学意义(P <0.05)。结论EPO 可能通过减少 Omi/HtrA2蛋白的转位,抑制 caspases-3通路激活,而发挥细胞保护作用。

关键词：缺氧复氧、促红细胞生成素(EPO)、细胞凋亡、Omi/HtrA2、RNA 干扰、caspase-3、缺血/再灌注损伤

分类号：R364.4(病理学)

资助基金：广东省自然科学基金资助项目10151051501000038;广东省科技计划项目No.20130319c Supported by the Natural Science Foundation of Guangdong Province10151051501000038;the Science and Technology Plans of Guangdong Province20130319c

在线出版日期：2015-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：439-443