miR-1246对人宫颈癌SiHa细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响及其靶基因的初步研究
目的:探讨miR-1246对人宫颈癌 SiHa细胞增殖、侵袭、迁移能力的影响。方法将 SiHa细胞分成3组,分别转染miR-1246 mimics(模拟物)、miR-1246 inhibitor(抑制物)、空白质粒,并测定转染效率。采用 MTT法对比转染后SiHa细胞增殖能力的区别;Transwell小室、划痕实验对比转染后 SiHa 细胞侵袭、迁移能力的区别;Western blot 对比转染后 SiHa细胞表达THBS2(血小板反应蛋白2)的区别。构建THBS2的3’UTR双荧光素酶质粒,与miR-1246共转染入 SiHa细胞,检测荧光素酶的相对活性。结果转染 miR-1246 mimics 的 SiHa细胞,MTT 试验显示其增殖能力较另外两组强;划痕实验显示细胞的迁移能力较另两组强;迁移、侵袭实验显示该组细胞穿膜数量较另外两组多(P<0.01);WB 实验显示其 THBS2蛋白低表达(灰度值6.28±10.22,与空白对照组相比P=0.013)。转染 miR-1246 inhibitor的 SiHa细胞,MTT试验显示其生长速度较另外两组慢;划痕实验显示细胞的迁移能力较另两组弱;迁移、侵袭实验显示该组细胞穿膜数量较另外两组少(P<0.01);WB实验显示其 THBS2蛋白表达稍高(灰度值12.90±19.81,与空白对照组相比P=0.037)。共转染 miR-1246 mimics 和包含 THBS2的3’UTR 端双萤光素酶质粒后, SiHa细胞荧光素酶表达降低。结论 miR-1246对人宫颈癌 SiHa 细胞的增殖、侵袭、迁移能力有促进作用,THBS2是其靶基因,降调靶蛋白THBS2的表达,可能是miR-1246促进宫颈癌发生发展的其中一个机制。
宫颈癌、微小 RNA-1246、血小板反应蛋白 2、SiHa细胞、增殖、侵袭、转移
R737.33(肿瘤学)
广西自然科学基金2011GXNSFA018184,2013GXNSFBA019130,2013GXNSFBA019132;广西卫生厅自筹课题Z2012071
2015-03-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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