DNA 损伤修复基因与人鼻咽癌细胞辐射耐受 CNE-2R 细胞的相关性研究

摘要：

目的：探讨射线诱导后 DNA 损伤修复相关基因在放射敏感性不同鼻咽癌细胞系 CNE-2、CNE-2R 的差异表达。方法中性彗星分析法检测细胞 DNA 的双链断链(DSB)；免疫荧光技术检测磷酸化组蛋白γH2AX 焦点形成、射线照射后细胞放射性损伤的时间剂量效应及放射敏感性的变化；基因芯片(OHS-029)技术检测 CNE-2及 CNE-2R细胞2Gy 照射前后的基因差异表达；Western blot 方法验证二者的差异表达蛋白质。结果4 Gy 的9MeV-β射线照射后2 h,CNE-2R 细胞与 CNE-2细胞相比,细胞 DNA 损伤程度加重,且随时间的延长更为明显。荧光显微镜显示,2 Gy 的9 MeV-β射线照射后6 h,CNE-2各时间段细胞γH2AX 阳性细胞率明显高于 CNE-2R 组。DNA 损伤相关基因表达谱分析发现,CNE-2和 CNE-2R 细胞相比,差异表达的 DNA 损伤修复相关基因共37个,其中上调基因24个,下调13个,其中6个位点差异6倍以上,3个位点低于0.1的差异表达；Western blot 结果显示,与 CNE-2细胞相比, GADD45a、RRAD1在 CNE-2R 中的表达水平明显下调,而 ERCC1及 PRKDC 蛋白质明显上调,与基因芯片的研究结果一致。结论9MeV-β射线照射后 CNE-2细胞 DNA 的损伤程度较 CNE-2R 细胞明显,CNE-2R 细胞放射抗拒性与DNA 损伤修复能力的基因差异表达相关。通过对筛选出的靶基因进行调控,有可能改变细胞的放射敏感性。

关键词：鼻咽癌、DNA 损伤修复、基因表达谱、放射抗拒性

分类号：R739.6(肿瘤学)

资助基金：陕西省科技发展计划项目2012K13-01-09

在线出版日期：2015-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：174-179