NT4p53(C22)Ant融合基因重组腺病毒的构建及对肝癌细胞的杀伤作用
目的:构建编码融合基因 NT4p53(C22)Ant嵌合肽的重组腺病毒表达载体,并研究其对人肝癌 HepG2细胞的杀伤作用。方法使用分子克隆技术,通过同源重组获得重组腺病毒 rAVV-NT4p53(C22)Ant,收集上清、大量扩增并测定其滴度。感染人肝癌 HepG2细胞,采用免疫组化法检测 p53表达,MTT 实验、流式细胞仪观察 rAAV-NT4p53(C22)Ant对肿瘤细胞的杀伤作用。结果成功构建重组腺病毒表达载体,感染人肝癌 HepG2细胞后 p53表达率为(44.88±2.45)%;MTT检测显示,细胞存活率随作用时间延长明显降低,与空病毒组及对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),流式细胞仪检测显示 G0/G1期细胞比例及凋亡细胞较空病毒组及对照组增加。结论构建的 NT4p53(C22)Ant重组腺病毒在肝癌细胞中能有效表达,对肝癌 HepG2细胞有抑制增殖和促进凋亡的作用。
NT4p53(C22)Ant、重组腺病毒、肿瘤、基因治疗
R735(肿瘤学)
国家自然科学基金81171356
2015-03-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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159-163,168