高表达FGFR4细胞株的建立及其生物活性分析
目的 构建FGFR4高表达细胞,研究FGFR4对细胞增殖能力的影响及相关蛋白活化机制,为研究以FGFR4为靶点的药物提供细胞模型.方法构建FGFR4真核表达载体并转染HEK293细胞,筛选稳定表达FGFR4细胞株,免疫印迹和免疫荧光分析FGFR4表达水平,细胞计数检测FGFR4高表达细胞的增殖情况,流式细胞仪检测FGFR4对细胞周期的影响,同时对ERK1/2磷酸化水平进行免疫印迹分析.结果 在相同培养环境下,HEK293-FGFR4细胞同HEK293-pcDNA细胞相比,其增殖能力提高.周期分析表明,FGFR4使G0/G1期降低,促进细胞的增殖.同时,对MAPK信号通路进行了初步分析,发现FGFR4蛋白可以引起ERK1/2的磷酸化,从而导致MAPK/ERK1/2通路的激活,说明FGFR4可激活MAPK信号通路.结论 成功构建了FGFR4高表达细胞株,为筛选以FGFR4为靶标的抗肿瘤药物奠定了前期实验基础.
成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4)、HEK293、高表达、细胞增殖
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Q71(生物大分子的结构和功能)
国家自然科学基金资助项目81202495,81101725;中央高校基本科研业务费专项资金xjj2011092
2014-03-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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