人不同孕期胎盘组织中实时荧光定量PCR内参基因的选择

摘要：

目的 比较人不同孕期胎盘组织中最常用的内参基因及其他几种管家基因mRNA表达水平的差异及稳定性,选出用于该研究的最佳内参基因.方法应用荧光实时定量RT-PCR技术检测6种管家基因[3磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)、β肌动蛋白(β-actin)、β2微球蛋白(β2-M)、18S核糖体RNA(18s rRNA)、RNA聚合酶Ⅱ(RPⅡ)、泛素(UBC)]在早、中、晚不同孕期孕妇绒毛和胎盘组织中mRNA的表达情况,并应用geNorm程序对内参基因表达稳定性进行分析.结果 在早、中、晚不同孕期的孕妇早孕绒毛或胎盘组织中内参基因GAPDH mRNA的表达水平变化最大,其中在早孕绒毛组织中表达水平最高,随着孕期的延长其表达水平逐渐降低;内参基因β-actin mRNA转录水平则呈相反的趋势变化,标本间mRNA表达水平变化亦较大;内参基因β2-M、18S和UBC mRNA表达水平在不同孕期标本间变化相对较小,其中内参基因RPⅡmRNA表达水平在不同孕期标本间变化最小.所选内参基因的表达稳定度由高到低依次为RPⅡ>UBC>18s rRNA>β2-M>β-actin>GAPDH.结论 在应用荧光实时定量RT-PCR技术研究基因转录表达时,应根据研究所用的材料选择合适的内参基因;本研究中RPⅡ是可用的稳定内参基因.

关键词：实时定量PCR、内参基因、GeNorm程序分析、不同孕期、胎盘组织

所属期刊栏目：35

分类号：Q789(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30800909

在线出版日期：2014-03-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：218-221