高盐培养基对人脐静脉内皮细胞株eNOS表达的影响及其机制
目的 探讨高盐培养基干预人脐静脉细胞融合细胞(EA.hy926)对eNOS表达的影响及相关机制.方法 予以EA.hy926细胞不同浓度的高盐培养基干预48h,选择137mmol/L氯化钠为高盐培养基的浓度;分别予以DMEM高糖培养基组(氯化钠浓度为109mmol/L)、高盐培养基(氯化钠浓度为137mmol/L)、高盐培养基(氯化钠浓度为137mmol/L)+RNA干扰、高渗对照组(甘露醇浓度为56mmol/L)干预48h,高效液相色谱法检测细胞上清液非对称二甲基精氨酸(ADMA)浓度,实时定量PCR和Western blot检测蛋白质精氨酸甲基转移酶1(PRMT-1)、RhoA、Rho 激酶(ROCK)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达及活性.结果 高盐组上清液中ADMA浓度、PRMT-1表达、RhoA mRNA表达及ROCK活性较对照组显著增高,eNOS蛋白表达显著降低;高盐培养基+RNA干扰组较高盐组ADMA浓度、PRMT-1、RhoA mRNA及ROCK活性明显下降,eNOS蛋白表达显著上调.结论 高盐培养基通过刺激ADMA生成并激活下游RhoA-ROCK通路而抑制eNOS的生成.
人脐静脉细胞融合细胞、内皮功能紊乱、非对称二甲基精氨酸、RNA干扰、内皮型一氧化氮合酶、高盐培养基
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R363(病理学)
国家自然科学基金资助项目30900616;国家重点基础研究发展规划973计划,2012CB517804
2013-12-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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