大鼠激活转录因子3单克隆抗体的制备和鉴定
目的 制备特异性识别大鼠激活转录因子3(ATF3)的单克隆抗体(mAb).方法 根据软件预测的结果合成偶联有匙孔绒血蓝蛋白(key hole limpet hemocyanin,KLH)的大鼠ATF3第168-181位氨基酸多肽.随后免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗大鼠ATF3的mAb.采用快速定性试纸法鉴定该单克隆抗体的亚型和亚类;通过ELISA、Western blot和免疫组织化学法鉴定单克隆抗体的特性.结果 获得一株可稳定分泌抗大鼠ATF3 mAb的杂交瘤细胞,其分泌的ATF3单抗的亚型是IgG1,轻链为κ链.Western blot结果显示,该单抗能够特异性识别大鼠细胞内表达的ATF3蛋白.免疫组织化学检测结果表明,在Thy-1肾炎(Thy-1N)大鼠肾细胞胞质及细胞核内均有ATF3表达,但细胞核内的表达量较为显著.结论 成功制备了一株抗大鼠ATF3的mAb,为进一步研究ATF3的生物学功能提供了可用的实验材料.
激活转录因子3、单克隆抗体、杂交瘤细胞、Western、blot、Thy-1肾炎、匙孔绒血蓝蛋白
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R392.11
国家自然科学基金资助项目30772016;江苏省基础研究计划自然科学基金资助项目BK2009417;江苏省教育厅自然科学基金08KJB310004;南京医科大学校级重点项目08NMUZ002;南京医科大学基础医学院新教师基金JX1011780109
2011-07-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共6页
379-384
