人doppel蛋白及其类似蛋白PrPΔ32-121对SH-SY5Y细胞的细胞毒性作用

摘要：

目的 体外观察细胞瞬时表达的人Dpl(doppel)蛋白对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的作用,并与其结构类似蛋白--截短型PrP(PrPΔ32-121)加以比较.方法 通过PCR方法获得人PRND基因及截短型PRNP基因并克隆至真核表达载体,瞬时转染SH-SY5Y细胞后,观察蛋白表达及其定位情况;采用MTT实验检测转染细胞的生长状态;用流式细胞仪、Western blot等方法检测转染细胞的凋亡状态.结果 两种蛋白均可在转染细胞中表达,并存在于细胞膜上;MTT结果显示,在转染24h后均出现明显的细胞毒性作用;细胞凋亡相关实验发现,转染细胞Annexin V/PI双染阳性细胞数量增多,pro-casepase-3和Bcl-2因子水平降低.结论 瞬时表达的Dpl蛋白与截短型PrP可产生类似的神经细胞毒性作用,并诱导启动细胞凋亡过程.

关键词：doppel蛋白、朊蛋白、细胞毒性作用、细胞凋亡

所属期刊栏目：31

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家科技攻关项目2006BAD06A13-2;国家973项目2007CB310505;国家自然科学基金委项目30800975;科研院所基金No.2008EG150300Supported by the National Science and Technology Task Force Project2006BAD06A13-2;the National Basic Research Program of China 973 Program2007CB310505;the Chinese National Natural Science Foundation Grants30800975;the Institution Technique R&D Grant2008EG150300

在线出版日期：2010-03-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：32-35,46