利用TRIzol(R)试剂和液氮提取大鼠胰腺高质量总RNA
目的 建立胰腺高质量总RNA快速、经济、稳定的提取方法.方法 应用TRIzol(R)试剂和液氮提取大鼠胰腺总RNA,通过总RNA含量和A260/280比值的测定及10g/L非变性琼脂糖凝胶电泳评估总RNA的质量,并用RT-PCR检测大鼠胰岛素1、胰高血糖素、胰α-淀粉酶和β-actin的表达.结果 利用TRIzol(R)和液氮提取的大鼠胰腺总RNA量可达到3~6μg/mg胰腺组织,A260/280比值在1.75~1.89之间.在10g/L非变性琼脂糖凝胶电泳时,均可见28S及18S条带,并且在28S、18S条带间可见明显的云雾状阴影.大鼠胰岛素1、胰高血糖素、胰α-淀粉酶、β-actin RT-PCR产物电泳结果显示均有清晰的条带.结论 应用TRIzol(R)试剂和液氮成功地提取了大鼠胰腺高质量的总RNA,后者可用于RT-PCR研究.
大鼠胰腺、总RNA提取、TRIzol(R)试剂、液氮
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Q813(生物工程学(生物技术))
国家自然科学基金资助项目30400249,30571725,30630058;陕西省国际科技合作重点项目2007-KW-06;陕西省自然科学基金资助项目2004C256;陕西省卫生厅基金资助课题D-04028
2009-12-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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