小鼠Reg3α基因cDNA成功转染MIN6细胞株并促其生长
目的 建立一过表达Reg3α cDNA的胰岛MIN6细胞株,研究其在低葡萄糖环境中的生长特性.方法 将全长Reg3α cDNA插入到质粒载体pcDNA3.1中,并将Reg3α pcDNA3.1和pcDNA3.1空载体用脂质体法转染胰岛MIN6细胞,分别获得Reg3α cDNA过表达和空载体pcDNA3.1MIN6细胞.应用Real time PCR和Western blot方法检测这两种细胞在低葡萄糖培养基中Reg3α的表达,并用MTT法测定Reg3α过表达对MIN6细胞生长的影响.结果 有三株Reg3α转染的细胞株显示Reg3α的高表达,在空载体转染的MIN6细胞株中未检测到Reg3α的表达,Reg3α mRNA和蛋白水平分别平均升高6～10倍.用Western blot检测发现Reg3α蛋白释放到培养液.采用MTT法测定,与空载体转染的MIN6细胞株相比,三株Reg3α稳定转染细胞株,7 d后细胞数目升高2倍.结论 本研究结果表明已成功地建立了过表达Reg3α cDNA的胰岛MIN6细胞.Reg3α可能具有内分泌作用,促进胰岛细胞生长.
MIN6细胞株、胰岛、Reg基因、转染、生长
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Q78;Q813(基因工程（遗传工程）)
国家自然科学基金资助项目30500249;国家留学基金委项目[留金出20063037]Supported by the National Natural Science Foundation of China30500249
2009-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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