新型抗ErbB2、抗CD16三价双特异性抗体的构建及功能鉴定

摘要：

目的 构建一种新型三价抗ErbB2、抗CD16 BsAb.方法 构建重组载体pET22b(+)/BsAb;转化大肠杆菌BL21(DE3),获得重组蛋白的表达,通过包涵体复性纯化蛋白.应用悬浮培养系统扩增稳定表达抗人CD16 scFv-Fc融合蛋白的CHO细胞株(CG5细胞)和稳定表达抗人ErbB2 scFv-Fc融合蛋白的CHO细胞株(HG2细胞),通过rProtein A Sepharose Fast Flow亲和层析柱纯化融合蛋白,应用流式细胞术分析BsAb的结合能力.结果 该BsAb可在大肠杆菌BL21(DE3)中以包涵体形式高效表达,通过对重组蛋白的复性可获得高纯度的蛋白;复性后的BsAb具有与其亲本抗体相似性的结合靶抗原的能力.结论 新型三价抗ErbB2、抗CD16 BsAb能与高表达ErbB2的乳腺癌细胞系SKBR3细胞高亲和力结合和表达CD16的人外周血单个核细胞低亲和力结合.

关键词：双特异性抗体、ErbB2、CD16、肿瘤免疫治疗

所属期刊栏目：29

分类号：R392.11

资助基金：国家基础研究发展规划项目"973"资助项目2006CB504305;国家高技术研究与发展项目"863"资助项目2006AA02A245;国家自然科学基金资助项目30571716和30771981

在线出版日期：2009-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：489-495