人MCHR1真核表达载体构建及稳定转染HEK293细胞系的建立

摘要：

目的 构建人MCHR1真核表达载体,转染HEK293细胞,建立稳定转染的HEK293细胞系.方法 采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR1基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染HEK293细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的HEK293细胞系,用RT-PCR、Western-blot检测MCHR1的表达.结果 构建了pcDNA3.1(+)/MCHR1真核表达载体,建立了稳定转染的HEK293细胞系,并成功地表达了目的 基因.结论 真核表达载体成功构建和稳定转染HEK293细胞系的建立为进一步研究MCHR1的功能奠定了良好的实验基础.

关键词：黑色素浓集激素受体(MCHR1)、真核表达载体、转染、HEK293细胞系、基因表达

所属期刊栏目：28

分类号：R338.2(人体生理学)

在线出版日期：2008-04-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：612-615