反转录病毒载体介导的EGFP基因在SK-N-SH神经母细胞瘤细胞中的表达

摘要：

目的 构建携带报告基因增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的反转录病毒载体,并且探讨病毒载体对SK-N-SH神经母细胞瘤细胞株的感染效率.方法 使用基因重组技术构建携带EGFP基因的反转录病毒载体(RV/EGFP).将稀释的RV病毒液感染NIH3T3细胞,计数NIH3T3荧光表达细胞的数量来确定病毒的浓度;使用RV载体感染SK-N-SH细胞,通过流式细胞学荧光检测明确RV在SK-N-SH细胞的感染效率.结果 成功构建了基因转移载体RV/EGFP,确定重组病毒的浓度为8.3×106病毒颗粒/mL.在SK-N-SH细胞RV/EGFP稳定转染并有效表达.在SK-N-SH细胞EGFP的荧光表达显示RV的转移并且表达的效率达到3O%以上.结论 SK-N-SH细胞能被RV病毒载体有效感染,在转基因细胞株外源基因的表达长期稳定并且显示RV病毒载体具有良好的基因转移效率.

关键词：SK-N-SH神经母细胞瘤细胞、增强型绿色荧光蛋白、反转录病毒载体

所属期刊栏目：28

分类号：R592(全身性疾病)

资助基金：国家自然科学基金30300395;30400515;高等学校博士学科点专项科研项目20030698011

在线出版日期：2007-04-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：10-13