丙型肝炎病毒核心蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定

摘要：

目的用含丙型肝炎病毒核心(HCV core)蛋白的cDNA片段构建酵母双杂交诱饵载体,并进行人胎肝cDNA文库的扩增、纯化和鉴定.方法PCR扩增含HCV core蛋白不同大小的cDNA片段,分别克隆入pUC19质粒,经测序正确后,再亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中.扩增人胎肝cDNA文库并纯化、鉴定.结果获得含HCVcore蛋白的cDNA片段,并成功克隆入pGBKT7中.待转化的人肝cDNA文库滴度在5×108左右,纯化后的质粒DNA质量浓度约1 g/L.用EcoRⅠ、XhoⅠ双酶切显示插入片段大小不一.结论成功构建了核心蛋白的酵母双杂交诱饵载体;扩增、纯化的人胎肝cDNA文库的多样性很好,适合于筛选.为用酵母双杂交技术研究与HCV core蛋白相互作用的蛋白打下坚实基础.

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白、酵母双杂交、cDNA文库

所属期刊栏目：27

分类号：R373.2(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：中国科学院资助项目30471532;陕西省科技攻关项目2004K15-G1

在线出版日期：2006-04-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：20-22,45