丙型肝炎病毒C区截短型基因原核表达载体的构建及在大肠杆菌中的表达

摘要：

目的建立稳定表达丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的原核表达系统,获得高产量的纯化核心蛋白.方法应用多聚酶链反应(PCR),以HCV-H株全长cDNA序列为模板,扩增获得C区羧基端部分缺失的基因片段,克隆入原核表达载体pBVIL1,构建原核表达载体pBVIL1-Ct,转化HB101宿主菌,通过温度诱导表达截短型C蛋白.结果扩增得到目的基因长度为462bp,构建pBVIL1-Ct表达载体,在HB101宿主菌中通过温度诱导获得稳定表达,表达蛋白占菌体总蛋白含量的24%.Western-Blot及ELISA检测证实表达产物可与HCV患者阳性血清发生特异性结合反应.结论羧基端部分缺失的HCV C区基因片段可在大肠杆菌中稳定表达并具有良好的反应原性.

关键词：丙型肝炎病毒(HCV)、核心蛋白、基因表达、大肠杆菌

所属期刊栏目：26

分类号：R373.21(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2005-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：320-322,326