人乳腺癌全套抗体可变区基因的扩增与克隆

摘要：

目的扩增人乳腺癌抗体全套可变区基因,将其克隆到T载体来构建T载体文库.方法收集乳腺癌患者外周转移淋巴结30例,TRIzol法提取总RNA、纯化mRNA,行RT-PCR扩增,制备T载体,用于PCR产物的克隆.结果总RNA纯度高,完整性好,mRNA获得率为1%.经RT-PCR,VH、Vλ、Vκ的每一条5＇端引物均与其相应的3＇端引物成功地扩增出了可变区基因片段,轻、重链T载体库分别为1.7×108和3.5×108.结论所采用的引物能够100%扩增目的片段,T载体过渡能显著提高克隆效率,为噬菌体抗体库的构建和筛选奠定了基础.

关键词：聚合酶链式反应、乳腺癌、抗体基因、T载体

所属期刊栏目：25

分类号：R737.9(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金30371399

在线出版日期：2005-01-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：558-561