人颗粒酶B融合蛋白基因的诱导表达导致HeLa细胞凋亡

摘要：

目的观察诱导表达的颗粒酶B融合蛋白对HeLa细胞形态和生长的作用. 方法用重组PCR法将活性型颗粒酶B基因序列的5'端连接绿脓杆菌外毒素(PE)的部分转位肽编码序列.所获融合蛋白基因克隆入pIND诱导表达载体后,与辅助质粒pVgRXR共转染HeLa细胞,经G418和zeocin筛选建系.间接免疫荧光检测蜕皮激素诱导后目的蛋白的表达,并通过电镜、TUNEL染色、细胞计数等方法观察细胞的形态和生长速度的变化.结果建立了可诱导表达人颗粒酶B融合蛋白基因的HeLa细胞系.蜕皮激素诱导后检测到目的蛋白的表达,同时观察到细胞出现多核巨细胞的异常形态,细胞生长受到抑制.电镜和TUNEL分析表明,颗粒酶B融合蛋白基因的诱导表达使部分细胞呈现凋亡的典型特征.结论颗粒酶B融合蛋白基因的诱导表达导致HeLa细胞凋亡.

关键词：颗粒酶B、融合蛋白、HeLa细胞、诱导表达、凋亡

所属期刊栏目：25

分类号：Q255(细胞生理学)

资助基金：国家高技术研究发展计划863计划2001AA217101;国家自然科学基金39925036;军队医药卫生科研项目01Z090

在线出版日期：2004-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：329-332