人脑源性神经营养因子重组腺伴随病毒的制备

摘要：

目的构建并产生人脑源性神经营养因子(human brain-derived neurotrophic factor, hBDNF)重组腺伴随病毒(adeno-associated virus, AAV)载体.方法将目的基因hBDNF插入载体质粒pSSHG-Neo的EcoRI-BamHI位点,构建重组质粒pSSHG-Neo/hBDNF.用腺病毒辅助质粒pFG140代替野生型腺病毒,包装质粒pAAV/Ad及已构建的重组质粒,三质粒磷酸钙共沉淀法转染80%融合的143细胞系,包装AAV-hBDNF.经蔗糖梯度离心法纯化、斑点杂交方法测定重组病毒滴度.结果重组病毒AAV-hBDNF滴度约为4.86×1014颗粒*L-1.结论成功制备了重组病毒AAV-hBDNF,为神经退行性疾病基因治疗实验奠定了基础.

关键词：人脑源性神经营养因子、腺伴随病毒、磷酸钙共沉淀法、斑点杂交

所属期刊栏目：24

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：陕西省自然科学基金2001SM66;西安交通大学校科研和教改项目

在线出版日期：2003-12-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：431-433,437