结核分枝杆菌Ag85A基因DNA疫苗的构建和免疫原性研究

摘要：

目的构建编码结核分枝杆菌蛋白Ag85A基因为基础的DNA疫苗.方法采用聚合酶链反应从结核杆菌H37Rv株基因组中,扩增出分泌蛋白Ag85A成熟蛋白的编码基因,用限制性内切酶消化后,插入克隆载体pGEM-T Easy中.经酶切鉴定与序列测定证实后,以亚克隆法构建于真核表达载体pcDNA3.1的相应酶切位点.重组质粒肌注免疫小鼠,4周后用ELISA法检测抗体滴度.结果结核分枝杆菌H37Rv株Ag85A成熟蛋白的编码基因经序列测定证实无突变;经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切鉴定证实克隆基因正确插入载体pcDNA3.1.ELISA法检测几何平均滴度为1∶1 000.结论以Ag85A成熟蛋白的编码基因为基础的DNA疫苗的成功构建和表达,为进一步研究其在结核病与肿瘤防治方面的作用奠定了基础.

关键词：结核分枝杆菌、Ag85A、DNA疫苗

所属期刊栏目：24

分类号：R378.911;Q782(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：西安交通大学校科研和教改项目PZ087

在线出版日期：2003-12-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：416-419