人B7.2(CD86)胞外区原核表达及其工程菌发酵培养的实验研究

摘要：

目的利用原核系统表达人B7.2（IgV+C）并对工程菌发酵培养条件进行优化。方法用聚合酶链反应（PCR）技术从B7.2cDNA全长中克隆B7.2（IgV+C），将PCR产物克隆入表达载体pGEX-4T-3从而得到重组体pGEX-4T-3／hB7.2（IgV+C），SDSPAGE及Westernblot用于检测目的蛋白的表达，同时对目的蛋白诱导表达时间及诱导剂浓度进行优化，对重组质粒的遗传稳定性进行鉴定。结果Westernblot结果显示相应分子质量55?kD处有hB7.2（IgV+C）与GST融合蛋白的高效表达，表达量占菌体总蛋白的30%左右。对工程菌进行发酵培养研究的结果表明，所构建的重组质粒在工程菌DH5α中传代稳定，未见质粒丢失，目的蛋白的表达不受影响，且在37℃诱导5h、IPTG终浓度为4mmol·L-1时其表达量最多。结论证明了利用原核系统表达人B7.2（IgV+C）的可行性。``

关键词：B7.2(CD86)、共刺激、融合蛋白、GST

所属期刊栏目：23

分类号：R39;R73

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：4-7