miRNA let-7a靶向抑制ACVR1B表达

摘要：

目的:探讨miRNA let-7a对ACVR1B表达的影响.方法:生物信息学分析表明activin receptor type 1B(ACVR1B)是一个let-7a的潜在靶基因.构建ACVR1B 3'UTR野生型(ACVR1B 3'UTR-WT)和ACVR1B 3'UTR突变型(ACVR1B 3'UTR-MUT)双荧光素酶报告载体,分别与let-7a模拟物(let-7a mimic)或let-7a阴性对照(let-7a NC)共同转染HEK293T细胞,通过双荧光素酶报告系统检测各组细胞的荧光素酶活性.分别转染let-7a mimic、let-7a inhibitor和let-7a NC至HEK293T细胞,采用qRT-PCR和Western blot分别检测ACVR1B的mRNA和蛋白表达水平.结果:ACVR1B 3'UTR含有let-7a潜在的高度保守的结合靶点(77～83位点).在HEK293T细胞中共转染ACVR1B 3'UTR-WT报告载体的let-7a mimic组比let-7a NC组荧光素酶活性组明显降低(P<0.05);而共转染ACVR1B 3'UTR-MUT报告载体的let-7a mimic与let-7a NC组其荧光素酶活性差异无统计学意义(P>0.05).在HEK293T细胞中let-7a mimic转染组中ACVR1B的mRNA和蛋白水平均低于let-7a NC组和let-7a inhibitor组(P<0.05).结论:ACVR1B是let-7a潜在调控的靶基因,miRNA let-7a可以直接抑制HEK293T细胞中ACVR1B基因的表达.

关键词：miRNAlet-7a、ACVR1B、转染

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分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31501164;浙江省科技计划项目2017C37127;浙江省大学生科技创新活动计划项目2018R413185;温州市医药卫生科研项目2018A09,2018A10;温州市科技计划项目Y20180505,Y20180489,Y20170254

在线出版日期：2020-01-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：7-11