EphA1/EphrinA反馈环调控内皮祖细胞促肝细胞癌血管生成潜能

摘要：

目的:研究体内外调控内皮祖细胞系EPCsEphA1/SiRNA-Tet中EphA1/EphrinA1信号通路对其细胞生物学行为及活体内促肝细胞癌血管生成潜能的影响.方法:体内外用不同浓度强力霉素调控EPCsEphA1/SiRNA-Tet中EphA1基因的表达,分为调控组Dox(+)(培养液中分别含强力霉素1、10和100μg/mL)和非调控组Dox(-);用Western blot法检测对EphA1/EphrinA1信号通路的影响;CCK8法、细胞划痕实验及细胞侵袭实验检测对细胞增殖、运动及侵袭能力的影响;绘制肝癌裸鼠移植瘤生长曲线结合瘤体免疫组织化学染色分析调控EPCsEphA1/SiRNA-Tet中EphA1基因的表达对其促血管生成潜能的影响.结果:体外实验中用10μg/mL强力霉素能最大程度抑制EphA1/EphrinA1信号通路活性,EphA1及其配体EphrinA1蛋白表达分别为0.293±0.029、0.603±0.038,与Dox(-)组的0.943±0.041、0.960±0.062比,差异均有统计学意义(t=12.940,4.864;P<0.001,0.008).细胞生物学行为分析显示调控EphA1基因表达对EPCsEphA1/SiRNA-Tet增殖能力并无影响;10μg/mL强力霉素调控时能最有效地抑制EPCsEphA1/SiRNA-Tet运动及侵袭能力,与Dox(-)组比差异均有统计学意义(t=4.435,2.467;P=0.002,0.039).体外100μg/mL强力霉素可最大程度诱导活体内EPCsEphA1/SiRNA-Tet中EphA1基因表达下调,在第6周移植瘤体积为(543.8±24.6)mm3,比Dox(-)组体积(924.5±81.8)mm3明显减少(t=4.909,P=0.001).免疫组织化学染色显示100μg/mL强力霉素调控组微血管为(21.6±3.6)个,明显少于Dox(-)组的(37.0±4.1)个(t=2.823,P=0.024).结论:不同浓度强力霉素可在体内外精确调控内皮祖细胞中EphA1/EphrinA1信号轴的活性,进而达到调控内皮祖细胞促肝癌血管生成潜能的目的.

关键词：肝细胞癌、内皮祖细胞、血管生成、EphA1/EphrinA1

所属期刊栏目：49

分类号：R73(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目81570583;国家自然科学基金青年基金资助项目81201953;教育部博士点新教师基金资助项目20113321120003;浙江省自然科学基金资助项目Y2090538

在线出版日期：2019-11-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：791-796