10.3969/j.issn.2095-9400.2018.07.009
大鼠骨髓树突状细胞的分离培养及HMGB1/TLR4信号通路的调控作用
目的:研究HMGB1/TLR4信号通路对大鼠骨髓树突状细胞(mDCs)MyD88、NF-κB P65、细胞因子、共刺激分子表达的影响,探讨此信号通路是否对mDCs具有调控作用.方法:mDCs分离、培养、纯化、鉴定后,随机分为5组,每组各设24、48、72 h 3个时间点.C组:mDCs加于RPMI l640完全培养基中;H组:加入HMGB1;H-Ab组:加入HMGB1后30 min再加入HMGB1特异性中和抗体;TLR4-A组:加入HMGB1后30 min再加入TLR4拮抗剂;IgG组:加入HMGB1后30 min再加入对照IgG抗体.检测各组各时间点mDCs MyD88、NF-κB P65蛋白和基因、共刺激分子(CD80、CD86)的表达及上清液中细胞因子(IL-6、IL-8、IL-12、TNF-α)的浓度变化.结果:24 h、48 h、72 h各组HMGB1刺激后MyD88、NF-κB P65蛋白和基因、细胞因子、共刺激分子表达明显升高,使用HMGB1特异性中和抗体、TLR4拮抗剂后明显下降,差异均有统计学意义(P<0.01).结论:HMGB1通过mDCs的受体TLR4影响下游MyD88、NF-κB P65蛋白和基因的表达,并刺激细胞因子的分泌,同时促进共刺激分子CD80、CD86的表达,对mDCs起一定的调控作用.
高迁移率族蛋白B1、Toll样受体4、信号通路、树突状细胞、大鼠
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R392.12
浙江省科技厅实验动物科技计划项目2015C37133
2018-08-15(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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