10.3969/j.issn.1000-2138.2013.01.02
S100P基因慢病毒表达载体的构建及对结肠癌Caco-2细胞的影响
目的:通过构建S100P慢病毒表达载体,研究其对结肠癌Caco-2细胞的影响.方法:以DLD-1细胞cDNA为模版,PCR扩增S100P基因序列,然后将该序列克隆插入慢病毒载体中,构建S100P慢病毒表达载体,包装产生慢病毒颗粒.将慢病毒颗粒感染Caco-2细胞,荧光显微镜观察细胞绿色荧光蛋白表达;应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹(Western blot)技术检测S100P的表达情况;MTT法检测细胞生长变化;细胞平板克隆培养检测其细胞克隆形成能力.结果:构建的慢病毒表达载体Lenti-S100P经酶切和测序鉴定结果正确;携带S100P基因的慢病毒颗粒感染Caco-2后,细胞中S100P基因和蛋白过表达,促进细胞克隆形成能力.结论:本研究成功构建S100P慢病毒表达载体,为深入研究S100P基因的相关功能提供了一定的实验基础.
S100P、慢病毒表达载体、结肠肿瘤
43
R73-3(肿瘤学)
国家自然科学青年基金资助项目81101823;浙江省自然科学基金资助项目Y2100018;浙江省钱江人才计划资助项目2011R10058;温州市科技计划项目Y20100017
2013-03-22(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
5-8