甲苯生物降解的关键酶基因克隆及表达

摘要：

目的:克隆、表达恶臭假单胞菌生物降解甲苯的关键酶基因.方法:恶臭假单胞菌WZ-1在含甲苯的MS培养基中培养以鉴定其降解甲苯的能力.设计引物扩增甲苯生物降解的关键酶——甲苯双加氧酶和邻苯二酚1,2双加氧酶基因,PCR扩增目的片段后进行T-A克隆,筛选阳性克隆并鉴定.构建甲苯双加氧酶-pET28a进行体外诱导表达.结果:恶臭假单胞菌WZ-1在含甲苯的MS培养基的生长曲线证明其具有降解甲苯的能力；通过重组技术获得阳性克隆,并以酶切、DNA测序进行鉴定；IPTG诱导后获得重组甲苯双加氧酶的高表达.结论:成功获得了用于降解甲苯的甲苯双加氧酶基因和邻笨二酚1,2双加氧酶基因,并在体外诱导表达了目的蛋白,为后续利用模式生物对苯系物的生物降解建立了实验基础.

关键词：恶臭假单胞菌、甲苯、克隆、原核表达

所属期刊栏目：42

分类号：Q781;Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：浙江省大学生科技创新活动计划新苗人才计划2010R413013;浙江省教育厅科研基金资助项目Y200804470

在线出版日期：2013-03-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：556-560