大肠杆菌Mn-SOD基因的克隆及表达

摘要：

目的:实现Mn-SOD基因在大肠杆菌(E.coli)中的可溶性表达,并对表达产物进行活性测定.方法:用PCR方法从大肠杆菌2号基因组中扩增Mn-SOD基因编码区,克隆到pUCm -T Vector,测定核苷酸序列;再将基因编码区克隆到原核表达载体PET -28a,构建含Mn-SOD基因的重组表达质粒,转化到大肠杆菌BL21中进行IPTG诱导表达.结果:SDS-PAGE分析表明SOD的表达量约为细菌总蛋白的50%;黄嘌呤氧化酶法测定表达蛋白活性,菌体可溶性总蛋白中表达产物酶比活为3921.8 U/mg,是对照BL21的276.8倍.结论:Mn-SOD基因可在BL21中成功表达,产物具有高可溶性、高活性的特点.

关键词：大肠杆菌、Mn-SOD、原核表达、活性测定

所属期刊栏目：39

分类号：Q781(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2009-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：53-56