过氧亚硝基阴离子对实验小鼠骨髓源内皮祖细胞的损伤作用

摘要：

目的:观察过氧亚硝基阴离子(ONOO-)对实验小鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)的体外损伤作用.方法:无菌抽取4周龄雄性C57小鼠骨髓,密度梯度离心法分离获取单个核细胞,EGM-2培养基诱导培养EPCs.用免疫荧光染色法进行EPCs表面标志物检测和功能试验鉴定EPCs,培养2~3代后用于实验.通过不同浓度的3-吗啉斯德酮亚胺(SIN-1,CONOO-供体)作用于EPCs 24h,确定SIN-1的有效作用剂量.将EPCs分为空白对照组、SIN-1组和FeTMPyP(ONOO-清除剂)干预组,分别用MTT法检测各组EPCs存活率,TUNEL法检测EPCs凋亡,免疫荧光染色法检测细胞内ONOO-生成印记——3-硝基酪氨酸(NT)表达情况.结果:上述培养细胞表面标记物和功能试验均阳性,是EPCs.800μM SIN-1刺激24h后EPCs存活率较空白对照组明显下降(P<0.05),10μM FeTMPyP干预能抑制这种作用.SIN-1刺激后EPCs凋亡率较空白对照组明显增加(P<0.05),FeTMPyP干预能抑制SIN-1诱导的EPCs凋亡.SIN-1刺激EPCs后细胞内NT表达较空白对照组明显增加(P<0.05),FeTMPyP干预能减少NT的表达.结论:SIN-1能够介导硝化应激,诱导EPCs凋亡,造成EPCs损伤,FeTMPyP干预能抑制SIN-1的上述作用.

关键词：过氧亚硝基阴离子、内皮祖细胞、凋亡、3-硝基酪氨酸

所属期刊栏目：22

分类号：R363.2(病理学)

资助基金：北京市自然科学基金7112012;心血管重塑相关疾病教育部省部共建重点实验室开放课题2012XXGB01

在线出版日期：2013-01-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1-4,后插1,后插2