改良的心肌微血管内皮细胞分离培养方法

摘要：

目的:建立一种细胞获得率高并且操作简单的心肌微血管内皮细胞体外培养体系.方法:无菌条件下分离左心室,0.1%胶原酶消化6 min后,加0.1%胰蛋白酶继续消化4 min,用100 μm滤网过滤消化液,离心收集滤液中血管段进行培养.用内皮细胞的重要标记物VIII因子相关抗原鉴定细胞,并通过3H-TdR掺入法观察培养细胞对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的反应性.结果:细胞的获得率为1.2×106细胞/g心肌组织,显微镜观察培养细胞具有内皮细胞生长特性:单层"卵石样"排列特征;VIII因子免疫细胞化学染色呈阳性;证实获得的是内皮细胞.bFGF刺激后3H-TdR掺入率与对照组比较差异显著(P＜0.05).结论:本研究利用改良的酶消化法,缩短了消化时间,提高了细胞获得率,同时培养的内皮细胞对生长因子具有良好反应性,表明该方法是一种比较理想的体外心肌微血管内皮细胞培养体系.

关键词：心肌组织、微血管、内皮细胞培养

所属期刊栏目：16

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金30370569;中国人民解放军总医院科研基金01YM30

在线出版日期：2006-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：10-11,14,封二