小鼠骨髓来源树突状细胞的分离与扩增培养

摘要：

目的:探讨树突状细胞(DC)分离纯化及其体外扩增的方法.方法:无菌制备C57BL/6小鼠骨髓;依次用红细胞裂解液去除红细胞,通过半粘附法去除T、B细胞,又在粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素-4(IL-4)协同诱导下培育,DC前体分化发育成DC并扩增.在第7天用脂多糖(LPS) 和肿瘤坏死因子-a (TNF-a)刺激48h,检测细胞因子白介素-12(IL-12)浓度及细胞表面标志CD11c、CD80、CD86和MHCⅡ.结果:DC细胞数增加,其形态在光镜下多为特征性星形,也有梭形和多角形; 至培养第9天DC细胞表面标志CD11c、CD80、CD86、MHCⅡ阳性率分别为86.32±12.14%、76.42±8.45%、77.12±9.05%、68.45±6.84%,IL-12浓度较未用LPS 和TNF-a组明显增加(P<0.01).结论:①结果所得细胞的形态和功能符合DC;②用LPS 和TNF-a刺激可以获得成熟DC.

关键词：小鼠、骨髓、树突状细胞、细胞培养

所属期刊栏目：15

分类号：R392.12;Q28

在线出版日期：2005-03-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：29-31