布鲁氏菌生物恐怖战剂RTqPCR现场检测方法研究

摘要：

建立实时荧光定量PCR现场快速检测方法,对生物恐怖战剂布鲁氏菌进行检测.根据NCBI获得16S核糖体RNA基因序列,应用生物信息学确定检测特异性序列,设计扩增引物.通过引物量、退火温度、退火时间,建立3水平3因素正交试验确定试验最佳反应条件,并分析反应的敏感性,利用溶解曲线分析反应的特异性,并采集室外环境积水和土壤样本进行实际测试.结果表明:反应最优条件为Sybr Green qPCR mix 10 μL,上下游引物各0.8 μL,超纯水7.4 μL,引物1μL,检测反应的灵敏度为220 CFU·mL-1,溶解曲线峰值单一,特异性良好.为现场布鲁氏菌基因检测提供一种有效、可靠的快速检测手段.

关键词：布鲁氏菌、生物恐怖、现场检测、实时荧光定量PCR

所属期刊栏目：38

分类号：D815.5;R378.5(国际关系)

资助基金：河北省重点研发计划项目19275602D

在线出版日期：2022-12-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：68-74