液相蛋白芯片法检测胱抑素C的条件优化与方法学评价

摘要：

目的 优化液相蛋白芯片检测胱抑素C(cystatin C,CysC)的条件并对其进行方法学评价.方法 采用液相蛋白芯片检测技术的双抗夹心法对CysC进行检测.在确定捕获抗体与检测抗体的最佳浓度组合的基础上,通过确定生物检测限与检测下限、绘制S型曲线和判断线性范围、建立标准曲线与回归方程对检测条件进行优化.对检测方法的正确度、精密度、可报告范围、分析特异性进行方法学评价.结果 液相蛋白芯片法检测CysC时捕获抗体与检测抗体的最佳浓度组合为26.6 μg/mL与1∶800;检测下限和生物检测限分别为0.037和0.237 ng/mL;回归方程为 y=-3.315x2+283.04x+160.89,R2=0.9921;该方法检测 CysC 的相对偏移为5.81％;稀释回收率为 70.35％～84.91％(n=3);加标回收率为 79.94％～122.41％(n=3);方法 学比对实验的相关系数r=0.616,P＜0.05,两种方法检测结果间的差异无统计学意义(t=0.948,P=0.358);批内精密度为3.54％～4.03％(n=10);中间精密度为 12.07％～15.05％(D=5,n=3);可报告范围为 0.26～3784.04 ng/mL;分析特异性试验结果显示,高、低浓度血红蛋白(160.00、71.11 g/L)对检测结果存在不同程度的干扰.结论 本研究完成了利用液相蛋白芯片检测CysC的条件优化与方法学评价.

关键词：液相蛋白芯片、胱抑素C、条件优化、方法学评价

所属期刊栏目：52

分类号：R155(营养卫生、食品卫生)

资助基金：国家重点研发计划;食品安全国家标准中重度营养不良用营养补充食品No.spaq-2019-104

在线出版日期：2023-07-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：460-464