10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2023.02.015
牡蛎中单核细胞增生李斯特菌PCR快速检测方法的建立
目的 建立一种无需前增菌快速检测牡蛎中单核细胞增生李斯特菌的PCR方法.方法 利用β-环糊精和膨润土包被活性炭处理牡蛎样品,去除聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)反应抑制因子,以单核细胞增生李斯特菌特异基因inlB为靶基因,建立无需样品前增菌的PCR快速检测方法.同时验证该方法的特异性、灵敏度及实用性参数,并评估该方法所用试剂在冷冻保存后的稳定性与实用性.结果 建立的PCR方法对130株目标菌和63株非 目标菌的检测特异性为100%,灵敏度达10 CFU/25g.该方法无需前增菌,4 h即可完成检测.PCR方法和国标方法对实际样品中单核细胞增生李斯特菌的检出率(均为13%)和活菌检测率(均为100%)一致,即符合率100%.此外,该方法所用试剂在-20℃冷冻条件下可稳定保存至少1年.结论 建立的PCR方法特异性强、灵敏度高,可快速、准确检测出牡蛎中的单核细胞增生李斯特菌.
单核细胞增生李斯特菌、β-环糊精、膨润土包被活性炭、牡蛎、聚合酶链反应
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R155.5(营养卫生、食品卫生)
河北省自然科学基金面上项目;河北省自然科学基金面上项目;河北省现代农业产业技术体系露地蔬菜创新团队项目;河北省重点研发计划;河北省高等学校科学技术研究青年基金项目
2023-04-23(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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